Βασισμένο στο εικονογραφημένο μυθιστόρημα του Frank Miller με τίτλο «Xerxes», και ειπωμένο με το μαγικό οπτικό στυλ του blockbuster «300», το νέο αυτό κεφάλαιο του επικού saga μεταφέρει
την δράση σε ένα νέο πεδίο μάχης –την θάλασσα- καθώς ο Έλληνας στρατηγός Θεμιστοκλής προσπαθεί να ενώσει όλη την Ελλάδα ηγούμενος ενός στρατού που θα αλλάξει την πορεία του πολέμου.
Το «300: Rise of an Empire» βρίσκει τον Θεμιστοκλή αντιμέτωπο με τις μαζικές δυνάμεις εισβολής των Περσών με αρχηγό τον θνητό που αυτοανακηρύχθηκε θεός, Ξέρξη, και την Αρτεμισία, την εκδικητική διοικητή του Περσικού ναυτικού στόλου.